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親和層析之蛋白A

更新時間:2021-08-25 點(diǎn)擊次數(shù):1209


球菌的細(xì)胞壁,與IgG的Fc片段具有非常強(qiáng)的特異性,分子量約為42×103,如圖所示。一般在蛋白 A親和層析中,配基在中性pH條件下結(jié)合抗體,在酸性pH條件下與蛋白解離。



蛋白A與抗體IgG的Fc片段結(jié)合模式


基于蛋白 A 親和層析的抗體捕獲工藝較為穩(wěn)定,但也存在一些不足,主要包括:

(1)介質(zhì)成本高。

(2)配基易脫落。

(3)洗脫條件苛刻。

(4)Protein A介質(zhì)的再生比較困難。


針對以上問題,部分商業(yè)化蛋白A親和層析介質(zhì)中使用的基本為改造的蛋白A配基,改善了天然蛋白A的缺點(diǎn),提高了耐堿能力和洗脫 pH。月旭科技推出的耐堿抗體親和介質(zhì)-耐堿Protein A Solid/耐堿Protein A 4FF, 由大腸桿菌表達(dá),經(jīng)層析純化獲得,純化過程不適用抗體柱親和層析,避免了產(chǎn)品中摻入無關(guān)IgG的可能,改配基pH耐受0.5M NaOH和0.5M HCl處理,不降解,抗體結(jié)合能力不變。該介質(zhì)適合從大批培養(yǎng)液捕獲單克隆抗體或Fc融合蛋白,也適合與從腹水或者血漿中捕獲多克隆抗體。


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