性色av蜜臀av色欲av,男女生内射视频外国网站,多猛男操鸡巴毛黄色视频,男生和女生导管视频网站

服務(wù)熱線

021-50276769
網(wǎng)站導(dǎo)航
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:主頁(yè) > 技術(shù)文章 > 考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量

考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量

更新時(shí)間:2022-02-07 點(diǎn)擊次數(shù):22884

考馬斯藍(lán)染色法又稱(chēng)Bradford法,是Bradford于1976年建立起來(lái)的一種蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定方法??捡R斯亮藍(lán)G-250測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色,最大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有最大光吸收。


實(shí)驗(yàn)儀器

分析天平、燒杯、玻璃杯、移液槍、紫外分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀。

實(shí)驗(yàn)試劑

標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液:常用牛血清蛋白(BSA),配制1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

0.01%考馬斯亮藍(lán)染色液G-250:稱(chēng)取0.01g考馬斯亮藍(lán)G-250,溶于95%乙醇中,加85%(m/V)的磷酸10mL,最后用超純水定容至100mL,裝入棕色瓶中保存。(不宜久存,室溫1-2個(gè)月)

實(shí)驗(yàn)步驟

紫外分光光度計(jì)測(cè)定


微信截圖_20220207162955.png

將表格所示溶液加入試管中充分混勻,10min后倒入比色皿,放入紫外分光光度計(jì)于595nm測(cè)定吸光值,1號(hào)管作為空白對(duì)照,以蛋白濃度為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)曲作為定量依據(jù)。

②樣品測(cè)定

取含10-100μL蛋白質(zhì)溶液于小試管中,加水稀釋至0.1mL,然后加入5mL G-250蛋白染色液,充分混勻,10min后倒入比色皿,放入紫外分光光度計(jì)于595nm測(cè)定吸光值,1號(hào)管作為空白對(duì)照,將測(cè)得吸光值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的蛋白質(zhì)含量。


酶標(biāo)儀測(cè)定


微信截圖_20220207163052.png

將表格所示溶液依次加入酶標(biāo)板中混勻,靜置10min后,放入酶標(biāo)儀中于595nm測(cè)定吸光值,A孔作為空白對(duì)照,以蛋白濃度為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)曲作為定量依據(jù)。

②樣品測(cè)定

取含4-40μL蛋白質(zhì)溶液于酶標(biāo)板中,加水稀釋至40μL,然后加入250μL G-250蛋白染色液,充分混勻,靜置10min后,放入酶標(biāo)儀于595nm測(cè)定吸光值,A孔作為空白對(duì)照,將測(cè)得吸光值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的蛋白質(zhì)含量。


注意事項(xiàng)

通常會(huì)將樣品稀釋多個(gè)梯度進(jìn)行測(cè)定,防止樣品測(cè)得吸光值過(guò)高,超出標(biāo)曲導(dǎo)致的含量計(jì)算偏差。

樣品中若含有去污劑,如TritonX-100、SDS等,會(huì)嚴(yán)重干擾測(cè)定結(jié)果。

比色反應(yīng)需在1h內(nèi)完成,如果測(cè)定要求很?chē)?yán)格,可以在染色液加入后的5-20min內(nèi)測(cè)定吸光值,因?yàn)樵谶@段時(shí)間內(nèi)顏色是zui穩(wěn)定的。

測(cè)定時(shí),蛋白-染料復(fù)合物會(huì)有少部分吸附在比色皿杯壁上,測(cè)試完后可用乙醇溶液將比色皿中的殘留物沖洗掉,再用超純水沖洗干凈保存。


2025 版權(quán)所有 © 月旭科技(上海)股份有限公司  備案號(hào):滬ICP備05030427號(hào)-4 GoogleSitemap管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

地址:上海市松江區(qū)明南路85號(hào)啟迪漕河涇(中山)科技園紫荊園10號(hào)樓 傳真: 郵件:marketing@welchmat.com

關(guān)注我們

服務(wù)熱線

掃一掃,關(guān)注我們

日韩大尺度综艺在线观看| 丁香婷婷综合激情国产ai| 思思久久99热只有精品| 处女座的幸运色和倒霉色| 裸体网站aaa| 欧美性受XXXX喷奶水| 91香蕉福利日韩精品导航| 九九99久久精品国产麻豆| 激情电影三级片毛片久久| 国产午夜福利不卡片在线| 国产亚洲精品久久久一区| hezyo综合久久88| 逼逼弄疼了视频| 欧美女人大黑逼| 男人操操逼的黄色网站。| 亚洲日本精品免费在线观看| 久草热久草中文在线视频| 国产av自拍| 国产亚洲精品90在线视频| 香港无码av一区免费看| 人人妻人人澡人人爽的视频| 亚洲 无码 AV 在线| 全彩调教本子h里番无码| 神马久久久久久久久久久| 大香蕉国产一区二区三区| 国产成人精品视频午夜蜜蜂| 日韩理伦一区二区三区视频| 黑几八擦日本屄| 九九热这里只有精品在线| 亚洲a视频在线| 日本中文字幕在线观看全| mm131美女愛做視頻| 国产毛女同一区二区三区| 欧美大鸡巴操 大逼视频| 国产午夜av一在线观看| 大鸡巴插爽逼流水多视频| 月经颜色是泥色是什么原因| 国产特级一级电影院看电影| 久久综合九色综合欧洲98| 女生小穴一线天| 欧美fba专线|